橡胶树AFLP银染体系的建立和优化

文献类型： 中文期刊

第一作者： 王惠君

作者： 王惠君;和丽岗;夏志强;王海燕;付瑜华;卢诚;王文泉

作者机构：

关键词： 橡胶;扩增片段长度多态性;基因组DNA;银染

期刊名称： 生物技术通讯

ISSN： 1009-0002

年卷期： 2007 年 18 卷 04 期

页码： 631-634

摘要： 目的:扩增片段长度多态性(AFLP)为遗传图谱的构建及育种的辅助选择提供了有力的工具。建立一套适合橡胶树的AFLP技术优化体系。方法:以197个GT1×IAN873橡胶树杂交群体为材料,通过对影响AFLP的多种关键因素如模板DNA质量、酶切连接体系、酶切连接反应时间、预扩增体系、选择性体系的分析进行研究。结果与结论:找出一套适于热带植物基因组DNA提取及橡胶树AFLP技术。用改进的CTAB法,经多次抽提纯化,用细玻璃棒挑出DNA得到高质量的模板DNA;酶切连接时DNA模板为250ng,反应体系采用各3U的EcoRⅠ/MseⅡ/T4连接酶,反应时间为9h;预扩增模板为稀释1/2的酶切连接产物,用量为1μL;选择性扩增要用稀释至1/20的预扩增产物。

分类号： S794.1

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