A型口蹄疫病毒多抗原表位杆状病毒表达载体的构建及表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李登科

作者： 李登科;刘新生;方玉珍;潘丽;吕建亮;张中旺;周鹏;蒋守田;张永光;王永录

作者机构：

关键词： A型口蹄疫病毒;多抗原表位;Sf9细胞;表达

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 09 期

页码： 881-886

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为构建A型口蹄疫病毒(FMDV)多抗原表位杆状病毒表达载体,将A型FMDV上5个B细胞表位(VP1140-160aa、VP270-80aa、VP352-67aa、3B29-42aa和3D16-30aa)和4个辅助性T细胞表位(VP1200-213aa、VP420-34aa、3A21-35aa和3D346-370aa)通过人工合成的方法串联起来构建复合多表位基因B。然后将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac HTB。将酶切和测序鉴定正确的阳性重组质粒pFastBac HTB-B转化至大肠杆菌DH10Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选。将PCR鉴定正确的重组杆状病毒质粒利用CellfectinⅡReagent转染至Sf9细胞。通过间接免疫荧光试验和Western-blot检测表达情况。结果显示,能够得到与A型FMDV猪抗阳性血清结合的蛋白,大小约为22.3ku,与预期结果相符。结果表明,成功构建了A型FMDV多抗原表位杆状病毒表达载体,并在昆虫细胞中正确表达,为下一步蛋白纯化奠定了基础。

分类号： S852.659.6

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