梭子蟹肌孢虫SYBR Green I实时定量PCR检测方法的建立与应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈甜甜

作者： 陈甜甜;房文红;王元;李新苍;赵姝;周俊芳

作者机构：

关键词： 梭子蟹肌孢虫;三疣梭子蟹;实时定量PCR方法;SYBR Green I

期刊名称： 南方水产科学

ISSN： 2095-0780

年卷期： 2017 年 06 期

页码： 22-29

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 梭子蟹肌孢虫(Ameson portunus)是感染三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的常见病原之一,该研究以其SSU rRNA基因为靶标建立了SYBR Green I实时定量PCR检测方法。结果显示:该方法扩增效率为101.45%,检测灵敏度下限可达2.0×10~1拷贝·μL~(-1),特异性、组内重复性和组间重复性均好。利用该荧光定量PCR方法对一批来自"牙膏病"流行区的养殖三疣梭子蟹样品进行检测,梭子蟹肌孢虫检出率为82.35%。检测结果显示,活蟹的每毫克肌肉平均带虫量大幅低于死蟹,表明该地区梭子蟹的死亡与肌孢虫的感染密切相关,而且,当梭子蟹肌孢虫载量达到1.0×10~9拷贝·mg~(-1)时三疣梭子蟹存在暴发疾病甚至死亡的风险。另外,通过对比检测发现,梭子蟹肌孢虫套式PCR方法对这批样品的检出率为64.71%,表明该研究建立的荧光定量PCR方法具有更高的灵敏度。

分类号： S945

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