猪急性腹泻综合征冠状病毒核衣壳蛋白新型线性B细胞表位的鉴定

文献类型: 中文期刊

第一作者: 曹丽艳

作者: 曹丽艳;孔祥雨;袁聪;段月月;马国祥;施磊;张宇;万颖;李想通;王娅婷;杜煜;郑海学;王琦

作者机构:

关键词: 猪急性腹泻综合征冠状病毒;N蛋白;6E8单克隆抗体;表位鉴定

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2025 年 56 卷 004 期

页码: 1854-1864

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)是一种蝙蝠来源的新型猪肠道冠状病毒,可引起新生仔猪腹泻、呕吐、脱水而死亡。SADS-CoV核衣壳蛋白(N)是病毒复制中最保守的结构蛋白,具有良好的抗原性。前期研究获得的5株抗SADS-CoV N蛋白的单克隆抗体(1C10、4B10、6G1、6F3和6E8),其中6E8与SADS-CoV的反应性最强。在本研究中,利用pET32a作为表达载体构建N蛋白的截短及缺失突变体质粒,经诱导表达后,用6E8进行抗原抗体反应。Western blot结果表明,6E8识别的抗原表位为69-QKGQRK-74。同源性分析结果显示,该表位在不同SADS-CoV毒株和蝙蝠冠状病毒HKU2中完全一致;在猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猫感染性腹膜炎病毒(FIPV)中发现相似的表位(VKGQRK),仅有一个氨基酸的差异;而在其他冠状病毒中同源性较低。特异性试验中,6E8不能与猪流行性腹泻冠状病毒(PEDV)和TGEV发生发应,尽管6E8识别表位与TGEV仅有一个氨基酸的差异,这说明69-Q是6E8识别表位的关键氨基酸。进一步试验发现,当6E8与SADS-CoV孵育后再感染Huh7细胞,能增强SADS-CoV的感染,出现抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement, ADE)现象。总之,SADS-CoV N蛋白新型B细胞表位的鉴定,将为设计SADS-CoV新型疫苗和开发表位相关的诊断试剂提供新的见解。

分类号: S852.651

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