禽网状内皮组织增生症病毒env基因的原核表达及其多克隆抗体制备

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李凯

作者： 李凯;高宏雷;祁小乐;高玉龙;高立;邓小芸;王笑梅

作者机构：

关键词： 禽网状内皮组织增生症病毒;env基因;原核表达;纯化;多克隆抗体

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2010 年 32 卷 10 期

页码： 812-814

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为原核表达禽网状内皮组织增生症病毒(REV)env蛋白及制备抗env蛋白的高效价多克隆抗体,本研究以pMD18T-env(HLJR0901株)为模板,扩增得到REV的env全长基因,将其克隆于pET-32a(+)中。将阳性重组质粒pET-env转化E.coli BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达。利用亲和层析纯化重组蛋白,复性后免疫BALB/c小鼠,制备抗env多克隆血清。SDS-PAGE及western blot结果表明,env基因以融合蛋白形式获得正确表达,相对分子质量约为84ku,表达产物具有良好免疫原性;IFA结果显示,制备的抗env多克隆血清能与REV野毒株特异性反应;ELISA效价达到1∶105以上。该研究为REV的检测及env蛋白的深入研究奠定了基础。

分类号： S854.43

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