龙眼GPX基因的克隆、原核表达及其在体胚发生过程中的表达分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈义挺

作者： 陈义挺;赖钟雄;方智振;蔡英卿;林玉玲;李焕苓;陈登云

作者机构：

关键词： 龙眼;体细胞胚胎发生;GPX;克隆;生物信息学;实时荧光定量PCR

期刊名称： 热带作物学报

ISSN： 1000-2561

年卷期： 2013 年 34 卷 08 期

页码： 1483-1489

收录情况： CSCD

摘要： 采用RT-PCR与RACE相结合的方法,从龙眼胚性愈伤组织中克隆了长947 bp含有完整开放阅读框的龙眼DlGPX cDNA序列(GenBank登录号为EU364813)和长度为1 736 bp的DNA序列(GenBank登录号为EU680970)。其编码1个含有168个氨基酸的蛋白质。DlGPX基因中含有5个内含子,均符合真核生物内含子通用的GT-AG法则。生物信息学分析显示:该蛋白为亲水的酸性蛋白质,定位于叶绿体;与其他植物的GPX有较高的同源性。将该基因构建成原核表达载体,经IPTG诱导表达了1个分子量约为23 ku的蛋白。利用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究该基因在龙眼体胚发生发育过程中的表达情况,结果显示,从松散型胚性愈伤组织到不完全胚性紧实球形结构阶段,DlGPX mRNA的转录水平逐渐升高,在胚性紧实球形结构阶段降到最低水平,子叶形胚阶段又上升到与不完全胚性紧实球形结构阶段相当的水平。

分类号： S667.2

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