弓形虫GJS株表面抗原1基因的原核细胞表达及其抗原性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 曹丽艳

作者： 曹丽艳;张德林;张燕丽;芦谮;蔡志杰;王艳华;赵晋军

作者机构：

关键词： 弓形虫;表面抗原1;克隆表达;抗原性分析

期刊名称： 中国人兽共患病学报

ISSN： 1002-2694

年卷期： 2009 年 25 卷 08 期

页码： 804-809

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 目的构建弓形虫GJS株表面抗原1(SAG1)重组表达质粒,研究SAG1蛋白疫苗诱导的保护性免疫作用。方法根据RH株弓形虫SAG1基因序列设计1对引物,利用PCR方法获得SAG1基因,克隆入pMD18-T载体,测序后进行序列分析;重新设计引物将其亚克隆至原核表达载体pET-30a中,在大肠杆菌中经IPTG诱导表达;重组抗原经纯化和复性后免疫小鼠,ELISA法测定其抗体滴度的变化,并用弓形虫速殖子攻击检测免疫保护力。结果与已知的SAG1基因核苷酸序列(S76248)及其编码氨基酸序列的同源性分别为99%、97%;表达的SAG1蛋白以包涵体形式存在,该重组抗原能被羊抗弓形虫阳性血清所识别;经间接ELISA检测,小鼠免疫后产生了较高的抗体;动物保护性实验表明,虽然与对照组相比免疫组小鼠存活时间有一定的延长,但差异无显著性。结论成功构建了弓形虫SAG1重组表达质粒,SAG1蛋白疫苗诱导小鼠的免疫保护力不强。

分类号： R392

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