葡萄SRAP反应体系优化及引物筛选

文献类型： 中文期刊

第一作者： 郭大龙

作者： 郭大龙;张君玉;李猛;张国海;刘崇怀

作者机构：

关键词： 葡萄;SRAP;体系优化;引物筛选

期刊名称： 基因组学与应用生物学

ISSN： 1674-568X

年卷期： 2010 年 29 卷 02 期

页码： 183-188

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本试验利用L16(45)正交试验设计探寻葡萄SRAP-PCR反应体系中的关键因子,同时结合单因素试验简单、快捷的特点逐个对PCR反应体系的主要成分进行优化。充分利用两种方法的优点并降低试验工作量取得了较好的效果,建立了适于葡萄的SRAP反应体系。结果表明Mg2+浓度为影响葡萄SRAP-PCR反应的关键因素;优化的20μL SRAP-PCR反应体系中各组分的最适含量为:10×Buffer2.0μL,Mg2+2.5mmol/L,dNTPs0.3mmol/L,引物0.4μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0U,模板DNA1.0ng/μL。利用SRAP反应体系,从100对SRAP引物组合中筛选出扩增稳定,条带清晰,多态性好的引物19对。本研究建立的适于葡萄SRAP-PCR扩增的反应体系,将为葡萄种质遗传多样性评价、基因组分析、指纹图谱构建,分子标记辅助育种和遗传改良研究提供基础。

分类号： S663.1

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