猪白介素4在CHO-K1细胞中的重组表达及生物学活性分析

文献类型： 中文期刊

第一作者： 陈国华

作者： 陈国华;景志忠;房永祥;王笑笑;窦永喜;蒙学莲;宋世斌

作者机构：

关键词： 白介素4;真核表达;CHO细胞;生物活性

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2008 年 28 卷 12 期

页码： 1452-1455+1467

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将猪白介素4(Porcine interleukin4,PIL-4)基因亚克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,构建重组表达质粒pEGFP-PIL-4,利用脂质体法转染CHO-K1细胞,采用荧光显微镜实时观察、RT-PCR和Western-blot分别检测CHO细胞转录表达目的分子的情况,通过MTT法检测所表达蛋白的生物学活性。结果在将重组质粒转染CHO-K1细胞中24、48 h后的均观察到绿色荧光;经G418筛选14~20 d后转染的细胞形成了阳性细胞集落,用RT-PCR扩增出约339 bp的目的基因片段;经Western-blot检测到约为39 000的特异蛋白分子条带,并证明在转染重组质粒的细胞中表达了高生物活性的重组蛋白。

分类号： S852.5

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