抗病转基因大豆事件B4J8049外源T-DNA整合位点分析及特异性检测

文献类型： 中文期刊

第一作者： 包婉莹

作者： 包婉莹;仲晓芳;杜茜;赵倩倩;杨向东

作者机构：

关键词： hrpZm;转基因大豆;整合位点;侧翼序列;事件特异性检测

期刊名称： 东北农业科学

ISSN： 2096-5877

年卷期： 2018 年 05 期

页码： 21-26

摘要： 大豆疫霉根腐病是由卵菌纲病原菌—疫霉菌(Phytophthora sojae)引起的大豆毁灭性病害之一。本研究前期利用农杆菌介导转化技术,将广谱抗病基因hrpZm导入栽培大豆Williams 82,获得高抗疫霉根腐病转基因大豆新品系B4J8049,并已进入环境释放试验阶段。为进一步推进该转化事件的生物安全评价及应用,本研究采用热不对称交错PCR(thermal asymmetric interlaced PCR,TAIL-PCR)方法分析外源T-DNA整合位点右边界序列,并依据其序列特征,建立该转化事件特异性检测方法。Southern杂交检测结果表明,转基因大豆事件B4J8049外源T-DNA插入拷贝数为1个。根据外源T-DNA插入片段序列设计3条嵌套特异性检测引物,与简并引物组合进行TAIL-PCR扩增反应,获得外源TDNA插入位点右边界序列。BLAST分析(https://soybase.org/)表明,外源T-DNA片段以单拷贝形式反向插入的方式整合到大豆基因组中第8号染色体的187 824位点。在此基础上,依据插入位点右边界序列设计检测引物,建立转基因大豆事件B4J8049特异性检测方法。本研究为该抗病转基因事件B4J8049及其衍生产品特异性检测提供依据。

分类号： S435.651

  • 相关文献

[1]一种转基因植物高特异定性检测方法. 许娜,黎娟华,宋书锋,王曼玲,彭明,夏新界. 2011

[2]转BADH基因苜蓿T-DNA侧翼序列分析及转化事件特异性分析. 张艳敏,张红梅,相金英,郭秀林,刘子会,李国良,陈受宜. 2011

[3]转基因大豆插入位点分析及特异性PCR检测方法的建立. 郭娜娜,吴辉,于晓惠,黄惜,陈银华,彭明. 2011

[4]不同TAIL-PCR通用引物在转基因大豆、水稻、油菜侧翼序列分离中的应用评价. 陈笑芸,汪小福,刘仁虎,张小明,周育,缪青梅,徐俊锋. 2013

[5]耐草甘膦转EPSPS/GAT大豆多重PCR检测体系的建立及应用. 文静,郭勇,邱丽娟. 2020

[6]外源抗草甘膦EPSPs基因在大豆基因组中的整合与定位. 王晓波,蒋凌雪,魏利,刘林,陆伟,李文欣,王俊,陶波,常汝镇,邱丽娟. 2010

[7]利用连接介导PCR检测外源基因整合位点体系的建立. 刘娣,李斌,张冬杰. 2013

[8]转mCherry基因水稻的遗传分析及T-DNA整合位点的研究. 李亚丽,刘中来,周洁,徐国娟,瞿绍洪. 2012

[9]piggyBac转座子在绒山羊基因组中的整合位点及其特征分析. 白丁平,方堃,杨明明,屈雷,陈玉林. 2012

[10]转Xa21基因水稻中T-DNA整合的遗传定位. 朱雪峰,陈学伟,李晓兵,钱前,黄大年,朱立煌,翟文学. 2002

[11]转基因高油酸油菜T-DNA插入拷贝数及整合位点分析. 陈松,张洁夫,浦惠明,申爱娟,周小婴,龙卫华,胡茂龙,戚存扣. 2011

[12]转OMT/PGH基因猪外源基因整合及遗传特性研究. 樊俊华,魏庆信,陈清轩,李奎. 1999

[13]原核注射法转基因猪外源基因整合位点的分布及其遗传规律. 魏庆信,樊俊华,郑新民,华文君,陈清轩,李奎,陈付学. 2002

[14]外源基因在转基因玉米中的整合位点分析. 王翠云,刘艳,刘允军. 2019

[15]转基因油菜W-4 T-DNA旁侧序列分析与事件特异性检测. 申爱娟,陈松,周晓婴,戚存扣. 2014

[16]转基因油菜W-4T-DNA旁侧序列分析与事件特异性检测(英文). 陈松,申爱娟,周晓婴,戚存扣. 2014

[17]转基因马铃薯外源基因插入位点分析及检测方法的建立. 闫建俊,白云凤,左静静,李萌,左敏,裴成成. 2020

[18]转cry1C基因抗虫水稻吉生粳3号外源基因整合分析与品系特异性检测. 金永梅,马瑞,于志晶,林秀峰. 2019

[19]转基因水稻BPL9K-2事件特异性检测方法的建立. 崔帅,王作平,于江辉,肖国樱. 2018

[20]转基因水稻吉生粳2号的外源基因旁侧序列分离及事件特异性PCR检测方法. 金永梅,马瑞,于志晶,林秀峰. 2016

作者其他论文 更多>>

微信小程序