猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 张浩吉
作者: 张浩吉;谢明权;张健騑;蒲文珺;覃宗华;蔡建平;王政富;顾万军
作者机构:
关键词: 猪附红细胞体;PCR;微孔板杂交;检测
期刊名称: 畜牧兽医学报
ISSN: 0366-6964
年卷期: 2007 年 38 卷 02 期
页码: 184-189
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法。通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值,用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程为y=2.1012-0.4492×logx,其相关系数R为0.977,显示对未知样品可进行定量检测。该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体CA株和E.wenyonii无交叉反应,其敏感性比常规PCR琼脂糖电泳检测提高了近100倍。用建立的方法对38份临床样品进行检测,结果有12份检测结果为阳性。
分类号: S854.43
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