猪细小病毒4型TaqMan荧光定量PCR方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

第一作者: 黄律

作者: 黄律;龙进学;翟少伦;刘长龙;张荣;袁世山

作者机构:

关键词: 猪细小病毒4型;TaqMan荧光PCR;检测

期刊名称: 动物医学进展

ISSN:

年卷期: 2011 年 01 期

页码: 1-9

收录情况: CSCD

摘要: 根据GenBank中发表的猪细小病毒4型(PPV4)全基因组序列,针对其结构蛋白VP2基因的保守序列,设计合成特异性引物及TaqMan探针,以VP2克隆质粒为标准品,通过对探针浓度、引物浓度、dNTP浓度、镁离子浓度以及退火温度进行调整,建立了PPV4的TaqMan荧光定量PCR。反应条件优化后,该方法在6.73×109copies/μL~6.73×101copies/μL范围内线性关系良好,相关系数为0.998;对PPV4的最低检测限为6.73×101copies/μL。特异性试验结果显示,用该方法检测其他基因型猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒及猪圆环病毒2型等临床常见病毒,...

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