稻瘟病抗病蛋白Pigm-1互作蛋白的筛选与鉴定

文献类型： 中文期刊

第一作者： 晋艺丹

作者： 晋艺丹;何旎清;程朝平;林少俊;黄凤凰;白康呈;张涛;汪文潇;余敏祥;杨德卫

作者机构：

关键词： 水稻;稻瘟病;Pigm-1;互作蛋白;OsbHLH148

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2025 年 58 卷 006 期

页码： 1035-1051

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】稻瘟病是水稻最重要的病害之一，稻瘟病抗性基因Pigm-1具有广谱抗性，但其抗病的遗传机制还不清楚，通过筛选并鉴定Pigm-1信号通路中的关键蛋白，为水稻抗病育种提供重要的理论依据。【方法】通过同源重组的方法构建诱饵载体p GBKT7-Pigm-1-CC1-576，检测诱饵蛋白自激活活性，同时，将p GBKT7和p GBKT7-Pigm-1-CC1-576质粒分别单独转化Y2H Gold酵母菌株检测诱饵蛋白毒性；利用稻瘟病菌诱导后构建的水稻酵母c DNA文库筛选水稻抗病R蛋白Pigm-1的互作蛋白，并通过Rice Information Gate Way（RIGW）比对与注释测序结果；利用荧光素酶互补（Luc）、免疫共沉淀（Co-IP）和酵母双杂交试验对Pigm-1与Osb HLH148进行互作验证；运用实时荧光定量PCR（q RT-PCR）对互作蛋白Osb HLH148对应的基因进行组织表达分析。【结果】自激活性检测显示，共转化诱饵蛋白p GBKT7-Pigm-1-CC1-576与AD质粒没有自激活现象，毒性检测结果表明，诱饵蛋白对酵母细胞毒性较小或没有毒性；通过筛选酵母文库，获得124个可能与Pigm-1互作的蛋白，涉及乙烯合成、赤霉素合成、活性氧清除、酶代谢等相关蛋白，还有功能未知蛋白；利用Luc、Co-IP和酵母双杂交试验验证了Pigm-1-CC1-576与Osb HLH148具有相互作用；进一步分析发现Osb HLH148受稻瘟病菌诱导表达；Osb HLH148在水稻6周龄的叶片中表达量最高。【结论】获得可能与Pigm-1互作的124个蛋白，其中Osb HLH148与Pigm-1-CC1-576具有互作关系，推测Osb HLH148可能在Pigm-1介导的稻瘟病抗性中发挥作用。

分类号： S435.111.41

  • 相关文献

[1]利用分子标记辅助选择聚合水稻抗病基因Pigm-1和Xa23. 杨德卫,何旎清,黄凤凰. 2023

[2]水稻酵母双杂交文库构建及PID2胞内结构域互作蛋白的筛选. 孙一丁,杨奕,刘畅媛,马继琼,许明辉. 2022

[3]杂交水稻恢复系福恢7185 OsSDR1基因的克隆与序列分析. 许惠滨,徐倩,连玲,朱永生,蒋家焕,谢鸿光,罗曦,江敏榕,郑燕梅,谢华安,张建福. 2017

[4]利用酵母双杂交系统筛选水稻类受体蛋白激酶FTPK1的互作蛋白. 李颖秀,潘教文,李臻,王庆国,刘炜. 2019

[5]利用分子标记辅助选择Pigm-1基因改良恢复系R20的稻瘟病抗性. 何旎清,杨德卫,郑向华,黄凤凰,程朝平,叶宁. 2022

[6]贵州省抗稻瘟病稻种资源的鉴选. 鄢小青,陈惠查,阮仁超,黎小冰,焦爱霞,谭金玉,陈能刚. 2017

[7]不同水稻间栽组合田间稻瘟病菌群体遗传结构分析. 谭清群,何海永,袁洁,陈小均,吴石平,杨学辉. 2013

[8]水稻杂糯间栽防治稻瘟病试验示范. 樊江顺,文炳智,何海永,文家明,梁蓉,张慧,袁洁,杨学辉. 2009

[9]不同水稻品种间栽方式控制稻瘟病试验. 冯雪松,何海永,江健,杨学辉,刘霞,詹金碧,黄发冰,袁洁. 2007

[10]不同水稻问栽组合田间稻瘟病菌群体遗传结构分析. 谭清群,何海永,袁洁,陈小均,吴石平,杨学辉. 2013

[11]抗稻瘟病Pi2/9/z-t基因特异性分子标记的开发. 华丽霞,汪文娟,陈深,汪聪颖,曾烈先,杨健源,朱小源,苏菁. 2015

[12]空间诱变水稻品系T2的稻瘟病抗性分析及抗病基因定位. 孙大元,陈冠州,张景欣,周丹华,王慧,朱小源,杨祁云,陈志强. 2016

[13]5个水稻品种对美国稻瘟病小种(IB-1,IE-1k,IG-1)的抗性遗传(英文). HUANG Bi-hu,严宗卜,游俊梅. 2012

[14]水稻杂糯间栽模式对优质糯稻控病与抗倒伏效果评价. 何海永,陈小均,吴石平,杨学辉,江健,冯学松,刘霞,袁洁. 2008

[15]湖南省地方稻种资源多抗性评价. 侯小华,魏子生,周祖铭. 2000

[16]广西稻瘟病和纹枯病的发生与综合防治. 王传之,张明环,李校雨,冯斗,李容柏. 2008

[17]不同组配药剂防治水稻稻瘟病、鞘腐病试验. 牛艳凯,张卓,张岩,王振萍,于洋. 2008

[18]江苏水稻主导品种的稻瘟病抗性及抗性基因遗传多样性. 李刚,王健,曹奎荣,李军,孙祥良,程保山,罗伯祥,杨子博,徐卫军,唐久友,储成才,袁彩勇. 2017

[19]丘陵区水稻品种多样性混合间栽控制稻瘟病研究. 朱有勇,刘新民,张顺元,刘安民,叶华智. 2002

[20]Pi-b、Pi-ta、Pikm和Pi54对水稻穗颈瘟的抗性评价. 范方军,王芳权,刘永峰,王军,朱金燕,李文奇,仲维功,杨杰. 2014

作者其他论文 更多>>

微信小程序