环介导等温扩增技术在鸭源成分检测中的研究
文献类型: 中文期刊
第一作者: 吴潇
作者: 吴潇;吕贝贝;蒋玮;白蓝;武国干;王金斌;王荣谈;潘爱虎;唐雪明
作者机构:
关键词: 牛;羊肉制品;等温扩增技术;环介导等温扩增技术;可视化检测
期刊名称: 食品与生物技术学报
ISSN: 1673-1689
年卷期: 2019 年 008 期
页码: 126-133
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了建立肉产品中鸭源成分的现场快速检测技术,根据动物种间特异性的原则,筛选出一对品种特异的PCR引物,在此引物扩增片段的基础上,设计了环介导等温扩增(LAMP)引物序列,能特异检测鸭源成分.通过条件优化实验,发现在25μL的扩增体系中,内外引物浓度比为1∶4,温度为63.5℃,MgSO4添加量为5 mM/μL,dNTPs添加量为1.75 mM/μL,Bst DNA聚合酶添加量为0.4 U/μL,甜菜碱添加量为0.25μmol/μL,LAMP反应时间为30 min时,LAMP检测体系检测效果达到最优,鸭肉DNA的检测灵敏度可达到10 pg/μL.对牛羊肉中鸭源成分比例的检测灵敏度为0.000 1%.应用该方法对上海市闵行区市场中的牛羊肉产品进行抽样检测,结果从21份样品中成功检测出5份含鸭源成分的混合肉.本研究建立的LAMP检测方法灵敏、快捷,可以实现鸭源成分的现场速测,为肉制品市场的监管提供了一种新方法.
分类号: TS251.7
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