我省板栗主栽品种(无性系)RAPD反应体系的建立

文献类型： 中文期刊

第一作者： 翁尧富

作者： 翁尧富;陈源;郑康乐;赵勇春;张建忠;廖石水

作者机构：

关键词： 板栗;RAPD反应体系;品种(无性系)鉴别;DNA指纹图谱

期刊名称： 浙江林业科技

ISSN： 1001-3776

年卷期： 2001 年 21 卷 03 期

页码：

收录情况： CSCD

摘要： 在ＲＡＰＤ反应中，有许多影响结果的稳定性和准确性。本项研究采用浙江省８个板栗主栽品种（无性 系），对ＲＡＰＤ各种反应条件进行了探索，结果表明，板栗理想的反应体系为：２０μｌ反应体积含有１００ ｍｍｏｌ／Ｌ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ，５００ ｍｍｏｌ／Ｌ ＫＣＬ， ２０ｍｍｏｌ／Ｌ ＭｇＣＬ２， ０．０１％Ｇｅｌａｔｉｎ，ｄＡＴＰ、 ｄＴＴＰ、 ｄＣＴＰ、 ｄＧＴＰ的量各为 １００μｍｏｌ／Ｌ， ５０－２００ｎｇ引物， ０．７５－１．０单位Ｔａｑ酶， ２－１０ｎｇ模板ＤＮＡ。反应条件为： ９４℃预变性２ｍｉｎ， 再９４℃　３０ｓ、４０℃３０ｓ、７２℃１．５ｍｉｎ扩增３８个循环；最后在７２℃延伸７ｍｉｎ。应用上述反应体系进行板栗 ＲＡＰＤ反应，扩增产物在１．０％琼脂糖凝胶中电泳，经ＥＢ染色后在紫外灯下观察照相，可获得满意的ＤＮＡ 指纹图谱。

分类号： S664.2

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