SS-HPS-APP三联亚单位疫苗对小鼠保护效果的评价

文献类型： 中文期刊

第一作者： 龚俊

作者： 龚俊;栾慧;栾天;赵谦;乔宏;李刚;刘思国;王春来

作者机构：

关键词： 猪链球菌病;副猪嗜血杆菌病;猪传染性胸膜肺炎;亚单位疫苗;小鼠免疫效力评价

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 009 期

页码： 978-984

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为评价猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病-猪传染性胸膜肺炎三联亚单位疫苗（下称三联苗）对小鼠的保护效果,本研究将猪链球菌（SS）保护性抗原EF和猪胸膜肺炎放线杆菌（APP）保护性抗原OMP、ApxI、ApxII序列分别克隆至pET-28a和pCold-sumo载体,再转化至E. coli BL21（DE3）中构建重组菌,经过诱导表达纯化获得重组蛋白r EF、rOMP、rApxI和rApxII。利用本研究室前期构建的pET-28a-sly/BL21、pET-28a-mrp/BL21、pET-28aoppa/BL21、pET-28a-oppa2/BL21、pET-28a-afua/BL21、pET-22b-cdtb/BL21 6株重组表达菌株,表达纯化SS的rSLY、rMRP和副猪嗜血杆菌（HPS）的r OPPA、rOPPA2、rAfuA、rCdtB。将上述重组蛋白等量混匀,使每一剂疫苗中各蛋白的含量均为20μg,再与ISA 201佐剂乳化制成三联苗。将血清2型SS（SS2）464株和SS9 GZ2株按照不同比例稀释后感染C57小鼠;将血清5型HPS（HPS5）HN10株、HPS13 ZD12株、血清5型APP（APP5）MD株和APP7 S-8株按照不同比例稀释后感染BALB/c小鼠,统计上述6个菌株对小鼠的最小致死剂量（MLD）。将20只C57小鼠和40只BALB/c小鼠均分成2组（每组含10只C57小鼠和20只BALB/c小鼠）,间隔14 d分别皮下免疫2次300μL PBS+ISA 201佐剂和三联苗。二免后14 d采集小鼠血清,通过间接ELISA检测各组小鼠的EF、MRP、SLY、OPPA、OPPA2、CdtB、AfuA、OMP、ApxI和ApxII的抗体水平。首免后28 d,将C57小鼠再按照免疫组别平均分为2组,分别以MLD的SS2和SS9攻菌;同理,将BALB/c小鼠再平均分为4组,分别以MLD的HPS5、HPS13、APP5和APP7攻菌。结果显示:SS2和SS9对C57小鼠的MLD均为5×107cfu/只,HPS5、HPS13、APP5和APP7对BALB/c小鼠的MLD分别为1.5×108cfu/只、5×107cfu/只、1.5×108cfu/只和7.5×108cfu/只。与免疫前相比,二免后14 d实验组小鼠体内对EF、SLY、MRP、OPPA、OPPA2、CdtB、AfuA、OMP、ApxI和ApxII的抗体水平显著升高（p<0.0001）,对照组小鼠体内对10种抗原的抗体水平均无差异;实验组与对照组二免后抗体水平差异显著（p<0.0001）。攻菌实验中,对照组小鼠在观察期内全部死亡,攻菌SS2、SS9、HPS5、HPS13、APP5和APP7的实验组小鼠存活率分别为100%（5/5）、80%（4/5）、60%（3/5）、80%（4/5）,80%（4/5）,100%（5/5）,对照组和实验组的存活率有显著差异（p<0.05）。以上结果表明该三联苗对SS2、SS9、HPS5、HPS13、APP5和APP7攻击的小鼠能够提供良好的交叉保护性。本研究首次系统研究并证实了该三联苗的免疫保护结果较好,为其进一步研究及应用提供了实验依据。

分类号： S859.797

  • 相关文献

[1]基于细菌表面展示技术的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗的小鼠保护效果评价. 赵谦,龚俊,栾天,徐盛奎,李刚,王春来. 2020

[2]败血型猪链球菌病的防治措施. 王宏业,朱向凯. 2008

[3]猪链球菌病与诊断技术研究进展. 丁小龙,丁耀忠,程芳珍,张杰. 2009

[4]猪链球菌病的综合防治与公共卫生安全. 马跃军,李玉荣,刘斌,高玉林. 2009

[5]流行性乙型脑炎及其防制. 华荣虹,步志高. 2008

[6]猪链球菌病的流行特点与综合防治. 段亚娜. 2017

[7]一例小型猪场猪链球菌病临床诊治. 赵海忠,彭明,李东升,万绪波,宋忠旭,彭先文,梅书棋. 2025

[8]副猪嗜血杆菌病的检测与防治研究进展. 杨茂生,吴位珩,杨莉,徐景峨,贾惠珺,魏开锡. 2010

[9]副猪嗜血杆菌病的诊断与防治措施. 杨茂生,吴位珩,杨莉,徐景峨. 2011

[10]副猪嗜血杆菌病的防治技术研究. 李明波,张抗抗,宋忠旭,梅书棋. 2012

[11]高致病性蓝耳病、猪圆环病毒病继发副猪嗜血杆菌感染的诊断和综合控制措施. 夏伟,蔡高忠,张宇辉,杨金雨,付彤,付朝阳. 2011

[12]猪传染性胸膜肺炎的诊断技术. 谢芳,张艳禾,司微,刘思国,王春来. 2010

[13]副猪嗜血杆菌病的危害及综合防控措施. 胡明明,张艳禾,王春来. 2010

[14]规模化猪场副猪嗜血杆菌病的诊断及综合防制. 许保疆,游一,郭成留,徐引弟,张玉杨,朱文豪. 2010

[15]头孢喹诺对副猪嗜血杆菌病的疗效试验. 熊华东,刘炜,许名辉,赵振华,姜海. 2009

[16]副猪嗜血杆菌病的流行病学调查. 王晓丽,王永明,逯忠新. 2017

[17]福建省部分地区副猪嗜血杆菌病的流行病学调查. 贺英,赵萍,储岳峰,高鹏程,逯忠新. 2010

[18]副猪嗜血杆菌Z32株的免疫效力研究. 周学利,蔡旭旺,胡晓苗,张丹俊,赵瑞宏,戴银,侯宏艳,潘孝成,沈学怀,朱传民. 2018

[19]猪传染性胸膜肺炎、伪狂犬病混合感染的诊断与防治. 任荣清,蔡一鸣,黄波,田海蓉. 2010

[20]不同免疫程序对仔猪接种猪传染性胸膜肺炎疫苗免疫效果的影响. 张志,张艳,刘海隆,曹宗喜. 2018

作者其他论文 更多>>

微信小程序