利用高效转座质粒构建羽毛分解菌Streptinomonas maltophilia YHJ-1的突变体库
文献类型: 中文期刊
第一作者: 黄亦钧
作者: 黄亦钧;季金殿;尤升波;游银伟;单成纲;岳寿松
作者机构:
关键词: 嗜麦芽窄食假单胞菌YHJ-1;转座子突变;插入突变体文库
期刊名称: 农业生物技术学报
ISSN: 1006-1304
年卷期: 2009 年 17 卷 05 期
页码: 191-196
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 嗜麦芽窄食假单胞菌(Streptinomonas maltophilia)YHJ-1是一株能高效降解羽毛角蛋白的菌株;该菌对卡那霉素等多种抗生素不敏感。利用携带Tn5转座酶和卡那霉素抗性转座质粒pRL27和含氯霉素抗性基因盒的pMCm质粒,构建了以氯霉素抗性作为选择标记的转座质粒pRH30。以大肠杆菌(Escherichia coli)UQ3021/pRH30为供体,通过双亲本杂交,构建了S.maltophilia YHJ-1的插入突变体文库,该库共含1246个转化子。随机挑选4个突变子经氯霉素抗性和PCR分析检测,结果显示突变体均有氯霉素抗性和氯霉素抗性基因,表明文库是可靠的。已从文库中筛选出3株不能降解羽毛转化子,表明利用氯霉素抗性的转座质粒pRH30构建菌株YHJ-1的突变体是克隆其相关基因并进行遗传分析的有效方法。
分类号: S182
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