棉花GhMYB42基因的克隆及原核表达

文献类型： 中文期刊

第一作者： 李晨宇

作者： 李晨宇;足木热木·吐尔逊;李晓荣;杨洋;李波;于月华

作者机构：

关键词： 陆地棉;GhMYB42;克隆;序列分析;原核表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2024 年 39 卷 001 期

页码： 48-54

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： MYB转录因子对棉花的生长发育起到重要作用,而GhMYB42为MYB家族之一的转录因子同样具有一定的研究价值,因此,从棉花中克隆了GhMYB42基因的编码序列,并构建了原核表达载体.利用生物信息学方法对GhMYB42的核苷酸序列及氨基酸序列进行了分析,通过Gataway BP和LR反应,将GhMYB42基因的编码序列构建到原核表达载体pGEX-4T-1上,通过设置不同的IPTG诱导条件来确定IPTG诱导蛋白的最佳条件,最后利用Western Blot鉴定重组蛋白.结果显示,GhMYB42(XP_016732693.1)全长序列1 508 bp,编码区长792 bp,编码263个氨基酸,预测分子量约为29.534 ku,等电点为5.18.氨基酸序列比对分析发现,MYB转录因子的序列相似率为80.62%,且GhMYB42蛋白N末端含有2个串联的SANT结构域,是一个R2R3转录因子.进化树分析结果显示,陆地棉MYB42蛋白与陆地棉中另一 MYB蛋白(XP_012439547.1)相似性最高并在一个分支上.蛋白诱导时由于各个试验梯度结果差别不明显,因此,选择的条件为IPTG的终浓度0.2 mmol/L,温度37 ℃,时间3 h,蛋白溶解的温度和时间为37℃诱导3 h.Western Blot结果表明,重组蛋白的大小正确,最终成功获得了大小为55.54 ku的GhMYB42重组蛋白,后续将对该重组蛋白进行纯化及深入研究转录因子GhMYB42的功能.

分类号： S562.03%Q78

  • 相关文献

[1]陆地棉GhUGP1基因的克隆与表达分析. 足木热木·吐尔逊,李晨宇,陈明,于月华,李晓荣,杨洋,王勇攀,李波. 2024

[2]陆地棉DGAT2基因全长cDNA的克隆与序列分析. 李兴丽,于霁雯,张金发,范术丽,宋美珍,黄双领,翟红红,喻树迅. 2010

[3]商陆抗病毒蛋白基因的克隆、序列分析及原核中的表达. 王锡锋,李莉,周广和. 2002

[4]少孢节丛孢菌新疆分离株几丁质酶AO-14基因的克隆表达. 钟文强,孟庆玲,乔军,陈英,贡莎莎,才学鹏. 2017

[5]绵羊肺炎支原体膜蛋白p74基因的克隆、分子特征及反应原性研究. 卢海亭,孟庆玲,乔军,彭叶龙,陈诚,田路路,贡莎莎,才学鹏,陈创夫. 2017

[6]蜡梅金属硫蛋白基因的克隆与原核表达. 秦平伟,段明革,孙文婷,李名扬,徐晶. 2010

[7]棉花转甲基酶基因GhBSMT1的克隆、原核表达及表达谱分析. 黄欣蒸,刘丹凤,张强,寇俊凤,曲爱军,张永军,郭予元. 2017

[8]陆地棉耐盐相关基因ChSAMS的克隆及表达. 周凯,宋丽艳,叶武威,王俊娟,王德龙,樊保香. 2011

[9]陆地棉脱水素基因GhDHN1启动子序列分析. 王俊娟,王德龙,王帅,阴祖军,王晓歌,樊伟莉,郭丽雪,郭晓宁,叶武威. 2017

[10]陆地棉MS5同源基因的电子克隆及序列分析. 唐向民,刘冬梅,陈鹏,韦丽君,周瑞阳. 2014

[11]棉花TCP家族转录因子基因GhTCP1的克隆与表达分析. 刘伟娜,韩建民,董金皋,李学勇. 2010

[12]陆地棉线粒体耐盐基因rps12的克隆与表达分析. 张天豹,陆许可,阴祖军,陈修贵,王德龙,王帅,王俊娟,樊伟丽,赵小洁,王晓歌,叶武威. 2015

[13]陆地棉耐盐相关基因GhERF79的克隆与分析. 邹长松,陆才瑞,王巧莲,宋国立. 2013

[14]陆地棉(Gossypium hirsutum)光敏色素B基因(GhPHYB)克隆及其生物信息学分析. 李建平,郝晓燕,陈勋基,陈果,罗城,刘海峰,黄全生. 2015

[15]陆地棉GhBZR1基因的克隆及功能研究. 贺浪,张华崇,司宁,简桂良. 2021

[16]桑树多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因MaPGIP1的克隆及功能分析. 王晓红,朱攀攀,梁燕梅,韩淑梅,赵爱春,王传宏,鲁成,余茂德. 2015

[17]鸭圆环病毒基因组序列分析及其C1截短基因的原核表达. 施少华,陈珍,杨维星,傅光华,程龙飞,陈红梅,彭春香,黄瑜. 2009

[18]绵羊AMH基因的克隆、序列分析与原核表达. 蒋香菊,吴阳升,林嘉鹏,汪立芹,张利,古丽米热·阿不都热依木,杨楠,刘莉,黄俊成. 2013

[19]Ⅰ型鸭肝炎病毒RNA聚合酶基因的克隆及原核表达. 王超,付玉志,张伟伟,陈宗艳,李传峰,杨宗伟,吴润,刘光清. 2011

[20]湘油15 PGIP9蛋白基因的克隆和蛋白序列结构分析及原核表达. 刘睿洋,皇甫海燕,靳芙蓉,官春云. 2012

作者其他论文 更多>>

微信小程序