宏基因组来源果胶酸裂解酶在毕赤酵母中的表达及应用

文献类型： 中文期刊

第一作者： 董俊帅

作者： 董俊帅;秦星;张志伟;张宇宏;张伟

作者机构：

关键词： 宏基因组;果胶酸裂解酶;毕赤酵母;苎麻;脱胶

期刊名称： 生物技术进展

ISSN： 2095-2341

年卷期： 2018 年 03 期

页码： 237-245+277

摘要： 果胶酸裂解酶可用于含果胶废水的处理、纸浆漂白以及棉麻纺织品的生物精炼等。基于高通量宏基因组测序技术,从富含果胶土壤宏基因组中挖掘得到一个果胶酸裂解酶基因pela。将pela连接表达载体p PIC9转化毕赤酵母Pichia pastoris GS115。在3 L发酵罐水平,甲醇诱导10 h后,培养基中果胶酸裂解酶活力达到10.8 U/m L。重组PELA的最适温度为45℃,最适pH为9.0,在pH 7.5~11.0具有良好的稳定性。PELA的比活力为244.12 U/mg,以聚半乳糖醛酸为底物时催化反应的Km和Vmax分别为0.26 mg/m L和488.40μmol/min·mg。EDTA及金属离子Cd~(2+)、Zn~(2+)、Mn~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(3+)能够高度抑制酶的活性,1 mmol/L Ca~(2+)和2 mmol/L K~+对酶活力有促进作用。将重组PELA作用于苎麻纤维4 h后,纤维质量损失率达到9.2%,苎麻纤维分散度和白度都明显提高。结果表明从宏基因组来源的果胶酸裂解酶PELA在苎麻脱胶中具有良好的应用潜力。

分类号： Q55`Q78

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