猪圆环病毒Ⅱ型Cap蛋白的原核表达、纯化和鉴定
文献类型: 中文期刊
第一作者: 江嘉欣
作者: 江嘉欣;王钊哲;许瑞;吴思敏;李嘉静;蔡爱群;林矫矫;洪炀;陆珂;李浩;陈兆国;石耀军;朱传刚
作者机构:
关键词: 猪圆环病毒;Cap蛋白;表达纯化
期刊名称: 医学动物防制
ISSN: 1003-6245
年卷期: 2018 年 07 期
页码: 671-675
摘要: 目的对猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)Cap蛋白的主要B细胞抗原表位进行分析,构建Cap表达多表位的原核表达系统,并对表达的目的蛋白进行分析,为猪圆环病毒诊断试剂开发奠定基础。方法设计并合成PCV2Cap基因,与PET-28a(+)载体连接后并转入大肠杆菌BL21(DE3)中构建重组质粒PET-28(a)-Cap,对重组质粒进行诱导表达获得重组蛋白,通过His亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。结果重组质粒在大肠杆菌中成功表达,蛋白质分子量约为17.4 k Da,与预期相符;Western blot结果显示,重组蛋白可以与猪圆环病毒阳性血清发生特异性结合。结论PCV2 Cap蛋白的表达纯化为圆环病毒血清抗体诊断方法的建立,进而为养殖场有效监控猪圆环病毒的免疫保护情况奠定基础。
分类号: S852.651
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