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农杆菌介导法获得匍匐翦股颖转GO基因植株

文献类型: 中文期刊

作者: 叶晓青 1 ; 佘建明 1 ; 王松凤 1 ; 张保龙 1 ; 唐侃 1 ; 倪万潮 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院农业生物技术研究所

关键词: 匍匐翦股颖;颗粒状愈伤组织;农杆菌介导;葡萄糖氧化酶;转基因植株

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2008 年 24 卷 03 期

页码: 251-256

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以匍匐翦股颖2个品种PentA-4和L-93的成熟种子为外植体材料,附加2,4-D 4.0 mg/L和KT 0.05mg/L的稍作修改的MS培养基为愈伤组织诱导和继代培养基。琼脂条的用量为16 g/L时,50%以上的愈伤组织呈浅黄色或白色、干燥、颗粒状结构。颗粒状愈伤组织经过连续3次继代培养后,其绿苗分化率保持在60%以上。以颗粒状胚性愈伤组织为受体材料,用农杆菌介导法将含有葡萄糖氧化酶(GO)基因和新霉素磷酸转移酶基因(NPT II)的重组质粒导入匍匐翦股颖。愈伤组织经农杆菌LBA4404/pBGO感染和共培养后,在附加G-418 60mg/L的愈伤组织继代培养基上选择到具有卡那霉素抗性的愈伤组织。抗性愈伤组织分化的绿苗在附加G-418 30mg/L的绿苗分化培养基上进行筛选,获得了抗性再生植株。试管植株的叶片经淀粉-碘化钾显色反应,检测到转GO基因植株产生的过氧化氢。PCR分子检测结果证明,GO基因已整合到转化植株的基因组中。抗病性鉴定结果显示,转GO基因植株抗水稻纹枯病。

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