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重组蛋白CTB-P97R1对猪支原体肺炎活疫苗滴鼻免疫效果的评价

文献类型: 中文期刊

作者: 韦艳娜 1 ; 张珍珍 1 ; 王丽 1 ; 王佳 1 ; 陈蓉 1 ; 冯志新 1 ; 邵国青 1 ; 熊祺琰 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室

关键词: 霍乱毒素B亚单位;P97R1;佐剂;滴鼻;猪支原体肺炎活疫苗

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2019 年 01 期

页码: 74-79

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为提高滴鼻免疫条件下猪支原体肺炎活疫苗的免疫效果,本研究设计引物扩增猪肺炎支原体P97R1基因,融合至霍乱毒素B亚单位(CTB)基因下游,构建了重组质粒p ET-CTB-P97R1。重组菌经IPTG诱导表达、分离纯化得到r CTB-P97R1重组蛋白。利用体外神经节苷脂(GM1)结合试验检测r CTB-P97R1的佐剂活性。随后将r CTB-P97R1与活疫苗混合后滴鼻免疫小鼠,免疫后采血和收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),分别检测其中的特异性Ig G抗体和s Ig A抗体的水平评价免疫效果。结果显示,r CTB-P97R1可以特异性结合GM1,具有生物学活性。小鼠免疫后的血清Ig G抗体显著高于活疫苗对照组(p<0.01),同时产生了高水平的P97R1特异性Ig G抗体(p<0.01);小鼠BALF中的s Ig A抗体也显著高于活疫苗对照组(p<0.05)。结果表明,r CTB-P97R1能够显著增强经滴鼻免疫的猪支原体肺炎活疫苗的免疫效力,同时可提升P97R1的免疫应答,有望作为经黏膜免疫的猪支原体肺炎活疫苗的新型佐剂。

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