文献类型： 中文期刊

作者： RAZZAQAbdul ¹ ; 张艳敏 ¹ ; 杨帆 ¹ ; 游颜杰 ¹ ; 赵和 ¹ ; 马峙英 ² ; 王海波 ¹ ;

作者机构： 1.河北省农林科学院遗传生理研究所

2.河北农业大学

关键词： 小麦;In planta;生长点转化,GUS,npt Ⅱ-BADH

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2005 年 01 期

页码： 17-22

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了躲避转基因技术对组织培养的过分依赖,本研究以小麦为材料尝试了一种对生长点直接进行转化的 方法,并初步证明了这一方法的可行性。具体做法是:将种子萌芽,然后剥去胚芽鞘暴露出生长点,再用玻璃纤维制 作的小刷子将生长点刺伤,最后用带有外源基因的农杆菌进行侵染处理。用携带hph-GUS基因的LBA4404农杆 菌,侵染处理1-11日龄幼苗(生长点),共培养7 d后检测新生芽中GUS的瞬时表达情况;侵染1-2日龄幼苗(生长 点),取长成植株的2-3朵小花进行GUS稳定表达检测。又用携带BADH和npt Ⅱ基因的AGL1农杆菌菌株侵染1 日龄的幼苗(生长点),在含100 mg/L卡那霉素的蛭石中进行选择。结果表明,GUS的瞬时表达率随被处理幼苗的日 龄增加而降低,以2日龄幼苗为最高(10.7％)。用花序检测GUS的稳定表达,被侵染受体为1日龄幼苗时的表达率 高于2日龄的幼苗。蔗糖的存在并不提高GUS基因在花序中表达的频率。不过花序表现为GUS阳性的植株后代, 经PCR检测后并没有证实GUS基因存在。用AGL1菌株进行转化,获得了13.6％的抗卡那霉素的绿色植株,但只 有3株呈现PCR阳性,且只有1株结了实。