文献类型： 中文期刊
作者： 王明钦 1 ; 沈文涛 1 ; 周鹏 1 ;
作者机构： 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所
关键词： PRSV;酵母双杂交;诱饵载体;构建;检测
期刊名称： 热带作物学报
ISSN： 1000-2561
年卷期： 2008 年 29 卷 03 期
页码： 369-373
收录情况： CSCD
摘要： 用PCR技术获得NIa-pro、NIa-vpg、NIb基因片段,将这些基因分别克隆到pBD-GAL4载体中,构建酵母双杂交系统的诱饵载体pBD-GAL4-NIa-pro、pBD-GAL4-NIa-vpg和pBD-GAL4-NIb。测序正确后,将重组质粒导入YRG-2酵母菌株,检测其表达产物对酵母细胞有无毒性及对报告基因有无激活作用。结果表明,获得了正确的NIa-pro、NIa-vpg、NIb基因片段,并成功克隆到pBD-GAL4诱饵载体中,且转化有诱饵载体的YRG-2在SD/-Trp营养缺陷平板上生长良好,说明表达产物对酵母细胞无毒性,对报告基因也无自激活作用,为下一步利用酵母双杂交系统检测与NIa-pro、NIa-vpg、NIb蛋白相互作用的蛋白奠定基础。
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