文献类型： 中文期刊

作者： 赵立平 ¹ ; 梁宏 ¹ ; 黄静 ¹ ; 杜建中 ¹ ; 杨宝茹 ¹ ; 王卉 ¹ ; 刘少翔 ¹ ; 张建华 ² ; 郑继法 ² ;

作者机构： 1.山西省农业科学院作物遗传研究所

2.山东农业大学烟草研究室

关键词： 青枯假单胞菌;软腐欧氏杆菌;细菌素;基因文库;启动子

期刊名称： 山西农业科学

ISSN： 1002-2481

年卷期： 1993 年 01 期

页码： 2-7

收录情况： 北大核心

摘要： 青枯假单胞菌无致病力突变株 A35可产生对蛋白酶 K 处理及热处理敏感的蛋白类杀菌物质——细菌素,制成活菌制剂用于种子、根系处理,有一定的防病效果。作为分离杀菌基因的基础,用载体 pLAFR3构建了 A35的基因文库,得到1138个克隆,插入片段的平均长度22.63kb,有99%的概率保证每个基因至少在库内出现1次。从库中得到1个在28℃下大量产生胞外多糖的克隆。作为提高拮抗基因表达强度的基础,用启动子探针质粒 pIJ3100克隆软腐欧氏杆菌的基因调控区,得到6400个克隆的启动子片段文库,通过三亲交配法转移到软腐菌中得到2300个接合子,通过筛选,得到4个抗560μg/ml 氯霉素的克隆。酶切分析表明,重组质粒均有外源 DNA 片段的插入,其中pSLB1的插入片段长度约1.65kb,左端为 BamHⅠ和 EcoRⅠ切点,右端是 HindⅢ切点。对该片段的亚克隆正在进行,以便用于构建高强度表达的杀菌基因。