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传染性造血器官坏死病病毒糖蛋白杆状病毒表达系统的构建及其抗原性分析

文献类型: 中文期刊

作者: 谢三磊 1 ; 温书香 1 ; 罗琳 2 ; 马志宏 2 ; 李桂萍 1 ; 李铁梁 2 ; 姜娜 2 ; 邢薇 2 ; 孙惠玲 1 ;

作者机构: 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

2.北京市水产科学研究所

关键词: 传染性造血器官坏死病病毒;糖蛋白;重组杆状病毒

期刊名称: 中国畜牧兽医

ISSN: 1671-7236

年卷期: 2017 年 44 卷 03 期

页码: 854-860

收录情况: 北大核心

摘要: 为研究传染性造血器官坏死病病毒(infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV)主要结构蛋白糖蛋白(G),本研究采用RT-PCR方法从IHNV中提取RNA并进行反转录,经PCR方法扩增获得1 380bp的G蛋白基因片段,将其克隆到pFB-LIC-Bse杆状病毒载体中,成功构建了重组质粒pFB-LIC-Bse-G,转化到大肠杆菌DH10Bac感受态细胞中,获得了重组杆粒rBacmid-G。将重组杆粒转染至Sf9昆虫细胞,获得了重组杆状病毒。间接免疫荧光(IFA)和Western blotting分析显示,重组G蛋白可与抗组氨酸单抗(Anti-His)、抗IHNV鼠血清发生特异性反应,表明本研究克隆的IHNV G蛋白在真核表达系统中得到正确表达,且该蛋白具有良好的抗原性。本试验结果为研究G蛋白的功能及开发IHNV新型疫苗奠定了基础。

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