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棉花纤维素合酶基因GhcelA1克隆及其载体构建

文献类型： 中文期刊

作者： 范小平 1 ; 范博红 2 ; 徐子勤 1 ; 杨维才 3 ;

作者机构： 1.西北大学生命科学学院

2.山西省农科院棉花研究所

3.中国科学院遗传与发育生物学研究所

关键词： 棉花;纤维素合酶;基因克隆;载体构建

期刊名称： 棉花学报

ISSN： 1002-7807

年卷期： 2009 年 21 卷 03 期

页码： 78-84

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GeneBank中GhcelA1(U58283)序列,利用RT-PCR技术,从棉纤维中克隆到Gh-celA1 cDNA全长。运用基因重组技术,构建pCAM2300-35S-GhcelA1过表达载体;融合基因表达载体pCAM2300-35S-GhcelA1-EGFP,以及pCAM2300-35S-GhcelA1-RNAi载体,这些载体均通过限制性酶切鉴定和测序验证。农杆菌介导法将融合基因转化棉花子叶,通过激光共聚焦荧光显微镜,在蓝色激发光下观察诱导的愈伤,发现在转化的活体细胞核与质膜内侧有绿色荧光,说明融合基因载体EGFP构建正确,可以在棉花中正常表达。所构建的系列载体可用于转化棉花,促进纤维素在棉纤维中合成与积累。

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