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J亚群禽白血病病毒gp85基因的原核表达及间接ELISA方法建立

文献类型: 中文期刊

作者: 刘丽娜 1 ; 邵华斌 1 ; 程国富 2 ; 杨峻 1 ; 张琳 1 ; 谢华丽 2 ; 栗绍文 2 ; 罗青平 1 ;

作者机构: 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所动物胚胎工程及分子育种湖北省重点实验室

2.华中农业大学动物医学院

关键词: J亚群禽白血病;gp85基因;蛋白表达;酶联免疫吸附试验

期刊名称: 中国预防兽医学报

ISSN: 1008-0589

年卷期: 2014 年 36 卷 01 期

页码: 38-41

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV-J)抗体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV-J gp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为38 ku,经western blot分析表明,重组蛋白gp85具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法,该方法对其它相关的禽类病原无交叉反应,其组内和组间的变异系数均低于13%,具有良好的重复性。对458份临床血清样品进行检测,同时用IDEXX的同类ELISA抗体检测试剂盒进行对比,总符合率达到96.29%。本研究为ALV-J的流行病学调查提供了一种简便的血清学诊断方法。

  • 相关文献

[1]J亚群禽白血病病毒gp85蛋白单克隆抗体的制备和鉴定. 刘丽娜,邵华斌,栗绍文,杨峻,程国富,胡薛英,罗青平. 2014

[2]2015~2017年湖北地区禽白血病病毒的分离及gp85基因序列分析. 刘丽娜,唐中文,赵宗正,汪辉,汪最,郑培培,王桂军,邵华斌,罗青平. 2018

[3]三株J亚群禽白血病病毒的分离及其gp85基因序列分析. 刘丽娜,罗青平,胡薛英,杨俊,张琳,邵华斌,栗绍文. 2012

[4]A、B、J亚群禽白血病病毒混合感染的鉴定及gp85基因序列分析. 窦俊峰,汪最,李丽,卢琴,金鑫鑫,凌小淳,罗青平,翟新国. 2024

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