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猪圆环病毒2型LAMP检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 申世川 1 ; 王一成 1 ; 袁秀芳 1 ; 徐丽华 1 ; 李军星 1 ;

作者机构： 1.浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪圆环病毒2型;环介导等温扩增;可视化;快速检测

期刊名称： 浙江农业学报

ISSN： 1004-1524

年卷期： 2013 年 25 卷 01 期

页码： 21-26

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 基于猪圆环病毒2型(porcine circocirus type 2,PCV-2)的ORF2基因建立了一种便捷、灵敏而又特异的可视化环介导等温核酸扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法。该方法通过针对PCV-2 6个位点的4条特异性引物,在Bst DNA聚合酶的作用下对PCV-2靶序列进行等温核酸扩增。经过对LAMP反应体系和反应条件的优化,所建立方法在61℃反应1 h能够成功的检测出PCV-2基因组DNA,且操作简单,不需要PCR仪等复杂仪器,结果可经电泳检测及肉眼观察;敏感性和特异性试验表明,所建立的方法能特异地检测PCV-2并且其敏感度可以达到0.5 pg的DNA分子;所建立LAMP方法的阳性检出率与国标PCR的阳性检出率符合度为100%。该研究为PCV-2的现场快速检测提供更加简便、快捷的方法,可以满足基层检疫的需要。

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