文献类型： 中文期刊

作者： 朱文雅 ¹ ; 吴海花 ² ; 张学尧 ² ; 刘娇 ² ; 张建珍 ² ; 马恩波 ³ ;

作者机构： 1.山西大学应用生物学研究所;山西大学生命科学学院;山西省农业科学院植物保护研究所;农业有害生物综合治理山西省重点实验室

2.;山西大学应用生物学研究所;山西大学生命科学学院;山西省农业科学院植物保护研究所;农业有害生物综合治理山西省重点实验室

3.;山西大学应用生物学研究所;山西大学生命科学学院;山西省农业科学院植物保护研究所;农业有害生物综合治理山西省重点实验室;

关键词： 细胞色素P450;飞蝗;基因表达;RNA干扰;杀虫剂

期刊名称： 昆虫学报

ISSN： 0454-6296

年卷期： 2017 年 07 期

页码： 742-749

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】研究飞蝗Locusta migratoria细胞色素P450基因的分子特性和生物学功能。【方法】搜索飞蝗转录组数据库,获得细胞色素P450基因cDNA序列,采用RT-PCR技术克隆目的基因cDNA全长序列。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)技术测定其在飞蝗5龄若虫不同组织(胃盲囊、前肠、中肠、后肠、体壁、精巢、卵巢、肌肉、血淋巴、脂肪体和马氏管)中及不同发育阶段(卵、1-5龄若虫及成虫)的表达水平。采用RNA干扰(RNAi)技术沉默飞蝗2龄若虫细胞色素P450基因,检测基因的沉默效率,并研究该基因干扰后,2龄若虫对杀虫剂马拉硫磷、西维因和溴氰菊酯3种杀虫剂的敏感性。【结果】克隆获得飞蝗细胞色素P450基因的cDNA全长序列(Gen Bank登录号:KT316378),将其命名为LmCYP6FD3,其核苷酸序列全长为1 563 bp,编码521个氨基酸。研究发现该基因在飞蝗5龄若虫马氏管中高表达,其次是后肠和脂肪体中,在其他组织中的表达量相对较低;对LmCYP6FD3在飞蝗不同发育阶段的表达进行检测,发现该基因在飞蝗整个发育阶段均有表达,在若虫期表达量较高。RNA干扰结合杀虫剂生物测定结果表明,LmCYP6FD3在RNA干扰24 h时的沉默效率最高;2龄若虫点滴接触西维因,RNAi处理组(dsLmCYP6FD3注射组)与对照组(ds GFP注射组)相比,死亡率提高了32%。【结论】克隆获得飞蝗LmCYP6FD3的cDNA全长序列,该基因在飞蝗马氏管中高表达,并可能参与西维因在飞蝗体内的解毒代谢。