文献类型： 中文期刊

作者： 刘素贞 ¹ ; 曹晓敏 ² ; 许丽娟 ² ; 白宇 ² ; 卢立志 ² ; 柴一秋 ³ ;

作者机构： 1.温州科技职业学院;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;浙江省亚热带作物研究所

2.;温州科技职业学院;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;浙江省亚热带作物研究所

3.;温州科技职业学院;浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;浙江省亚热带作物研究所;

关键词： CCK-8法;鸡;外周血淋巴细胞;增殖活性;检测波长;血清浓度;OD值

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2017 年 13 期

页码： 212-214

收录情况： 北大核心

摘要： 为了研究应用CCK-8法检测鸡淋巴细胞增殖的体外培养最佳条件,试验设置了不同种板细胞数、血清浓度、培养时间、孵育时间和检测波长等条件对其进行比较研究。结果表明:1 750 r/min转速的改良鸡外周血淋巴细胞分离方法效果最佳;在体外增殖培养试验中,CCK-8加样4 h后在450 nm波长处检测OD值最理想,培养时间以44 h为最佳;在细胞数量一致的情况下,胎牛血清浓度为5%或者为10%差异不显著(P>0.05)。当细胞悬液浓度为1×10~6个/m L时,加入100,50,25,12.5μL不同细胞数,4组间比较均差异显著(P<0.05),并且随着细胞悬液浓度的增加OD值增加;最佳铺板细胞的细胞悬液浓度为2.0×10~6~3.0×10~6个/m L,取50~100μL为宜,即最佳细胞铺板数量控制在每孔1.5×10~5~2.0×10~5个/100μL。说明应用CCK-8法检测鸡外周血淋巴细胞活性的最佳条件除种板细胞数不同外,在检测波长、血清浓度、加样后孵化时间等方面与其他动物试验差别不大。