文献类型： 中文期刊
作者： 靖相密 1 ; 褚云霞 1 ; 汤庚国 1 ; 张永春 1 ; 刘忠 1 ; 张慧 1 ;
作者机构： 1.上海市农业科学院园艺研究所
关键词： 蜡梅;保存方法;DNA提取;ISSR-RCR
期刊名称： 分子植物育种
ISSN： 1672-416X
年卷期： 2008 年 6 卷 02 期
页码： 188-193
收录情况： CSCD
摘要： 本文以蜡梅新鲜成熟叶片为对照,比较了真空冷冻干燥、硅胶干燥、压标本干燥、45℃烘干、75℃烘干5种叶片干燥方法和4℃保鲜、-20℃冻存、-70℃冻存法对蜡梅总DNA提取效果的影响。结果表明硅胶干燥的样品提取的DNA完整无降解,纯度高,DNA得率为鲜叶的1/3多,压标本干燥的样品可以提到完整的DNA,DNA得率与硅胶干燥的样品相近,提取的DNA含多酚,纯度低。真空冷冻干燥样品的DNA在冷冻干燥过程中小部分受到损伤,DNA得率较鲜叶稍有下降。45℃烘干的样品可以提取到完整的DNA,纯度高,DNA得率约为鲜叶的1/2,75℃烘干的样品的DNA全部降解。ISSR扩增结果表明75℃烘干的样品提取的DNA没有获得扩增产物,其他4种干燥方法提取的DNA的扩增结果与鲜叶相同。鲜叶可在4℃冰箱保鲜存放6d,在-20℃冰箱中冷藏半月,可在-70℃超低温冰箱中长期放置而不影响总DNA的提取质量和ISSR扩增结果。
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