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鲢生长激素cDNA表达载体构建及在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 陈松林 1 ; M.Schartl 2 ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院黄海水产研究所

2.BiocenterofUniversityWuerzburg

关键词： 鲢;生长激素cDNA;表达载体;大肠杆菌

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2002 年 26 卷 03 期

页码： 201-205

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 应用RT—PCR技术从白鲢垂体mRNA中扩增出GH全长cDNA片段 ,长度 1.2kb。将 1.2kb白鲢GHcDNA克隆到载体质粒pBluescriptKSII +(pBSKSII +)中 ,构建了pBS -scGHcDNA克隆 ;通过含有NdeI酶切位点的特异引物扩增出不含信号肽序列的cDNA片段 ,将其重组到pRSET5b载体质粒中 ,构建了白鲢GHcDNA表达质粒pRSET -scGH。将此表达质粒转化BL2 1(DE3)大肠杆菌 ,经IPTG诱导后 ,在转化的大肠杆菌中检测到GH蛋白的存在。Western印迹表明该蛋白带与草鱼GH单克隆抗体具有强烈的免疫反应。

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