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鸭IFN-β启动子及其NF-κB结合位点荧光素酶报告质粒的构建与活性检测

文献类型: 中文期刊

作者: 张蓉蓉 1 ; 卢琴 1 ; 王红琳 1 ; 张腾飞 1 ; 温国元 1 ; 罗青平 1 ; 汪最 1 ; 邵华斌 1 ;

作者机构: 1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室

关键词: 鸭干扰素β;启动子;荧光素酶报告质粒;Poly(I∶C);DTMUV

期刊名称: 湖北农业科学

ISSN:

年卷期: 2020 年 0S1 期

页码: 207-209,212

收录情况: 北大核心

摘要: 通过PCR方法,扩增得到鸭I型干扰素β(IFN-β)基因启动子功能区域的DNA片段和其4个重复NF-κB结合位点的DNA片段,亚克隆到含萤火虫荧光素酶报告基因pGL4.2-basic载体上,构建了包含鸭IFN-β启动子及其NF-κB结合位点的荧光素酶报告质粒pduIFN-β-luc和4×NF-κB-luc;分别将构建的两个报告质粒与海肾荧光素酶内参质粒pRL-TK用JetPEITM转染试剂共转染至鸭胚成纤维细胞系DEF,在转染24 h后,用poly(I∶C)刺激转染细胞,结果表明,与未刺激组相比,刺激组的荧光素酶活性均显著增加。为进一步研究鸭天然免疫信号通路提供了重要的研究工具。

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