文献类型： 中文期刊

作者： 赵文闻 ¹ ; 徐黎明 ² ; 陈桂花 ² ; 段凯越 ² ; 赵景壮 ² ; 任广明 ² ; 邵轶智 ² ; 张颖 ² ; 卢彤岩 ² ;

作者机构： 1.大连海洋大学

2.中国水产科学研究院黑龙江水产研究所黑龙江省水生动物病害与免疫重点实验室

关键词： 虹鳟;传染性胰脏坏死病毒;大鳞大麻哈鱼胚胎细胞;虹鳟性腺细胞;病毒载量

期刊名称： 水产学杂志

ISSN： 1005-3832

年卷期： 2022 年 35 卷 001 期

页码： 1-8

收录情况： 北大核心

摘要： 大鳞大麻哈鱼胚胎细胞(Chinook salmon embryo cells,CHSE-214)和虹鳟性腺细胞(Rainbow trout gonad cells,RTG-2)是传染性胰脏坏死病毒(Infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)检测的国家标准所推荐使用的鲑鳟鱼源细胞系.本研究选用24株IPNV毒株,以1 000倍半数组织培养物死亡剂量(50%tissue culture infective dose,TCID50)分别接种于CHSE-214和RTG-2细胞,以细胞病变情况比较这两种细胞对IPNV的敏感性.将IPNV以10 TCID50和 100 TCID50接种在筛选出的最敏感细胞系上,每天观察细胞的病变及变化,收获病毒培养物.利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)及病毒滴度测定法分析IPNV在敏感细胞上的增殖状况.结果显示,接毒后7 d时,全部毒株均能在CHSE-214细胞上增殖,并导致细胞病变,而仅有8株IPNV能在RTG-2细胞上增殖,导致细胞病变,表明CHSE-214细胞对IPNV的敏感性高于RTG-2细胞.利用RT-qPCR和TCID50法分析IPNV在CHSE-214上的增殖情况发现,随着接毒时间的增加,病毒量整体呈现先升高后降低的趋势,接毒后3 d时达到最大值.该增殖趋势均出现在不同接毒剂量组,除接毒后1 d时,其余各时间点10 TCID50剂量组的病毒量均显著高于100 TCID50剂量组(P<0.05).本研究结果表明,CHSE-214细胞比RTG-2更适合用于IPNV的体外分离培养,且在多数细胞出现典型细胞病变而尚未完全脱落时病毒含量最高,此时适合收集病毒培养物进行病毒检测.本研究可为IPNV的检测提供科学指导.