文献类型： 中文期刊

作者： 符贵红 ¹ ; 杨先乐 ² ; 喻文娟 ³ ; 胡鲲 ² ; 章海鑫 ⁴ ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.上海海洋大学国家水生动物病原库

3.上海水产大学农业部渔业动植物病原库

4.江西省水产科学研究所

关键词： 细胞色素P4503A;肾细胞;草鱼;CYP3A基因和酶活性;诱导表达;利福平

期刊名称： 中国水产科学

ISSN： 1005-8737

年卷期： 2011 年 18 卷 04 期

页码： 720-727

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用基因克隆技术获取草鱼(Ctenopharyngodon idellus)细胞色素P450 3A(CYP3A)cDNA序列长1 849 bp,包含完整开放阅读框(open reading frame,ORF)1 542 bp,1个终止密码和含polyA信号3′UTR;ORF编码514个氨基酸,含信号肽(29 aa),2个跨膜螺旋区(23 aa,23 aa),血红素结合域(21 aa)和6个底物识别位点(SRS1-6);与其他脊椎动物CYP3A氨基酸序列相似度达60%～92%。用实时定量PCR和分光光度计法分别研究了草鱼肾细胞系(Ctenopharyngodon idellus kidney cell line CIK)中利福平(rifampicin,RIF)诱导CYP3A基因表达和红霉素-N-脱甲基酶(ERND)活性,采用红霉素脱甲基酶活性法测定CYP3A的活性。结果显示,诱导组CIK细胞中CYP3A mRNA表达量在8 h最高,而CYP3A酶活在10 h最高;CYP3A mRNA和酶活性与对照组均具显著差异性(P<0.05)。CYP3A转录水平先于相应酶活变化表达,且转录水平表达显著高于酶活性,这很可能反映了RIF对CYP3A的诱导主要作用于转录水平而不直接作用于酶活,本研究旨为药物对CYP3A转录调控和活性调节提供科学依据,并为渔药代谢酶的研究提供理论依据。