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家兔早孕因子原核表达及重组蛋白的纯化、复性与鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 杨杰 1 ; 张海涛 2 ; 翟频 1 ; 白文霞 3 ; 潘孝青 3 ; 邵乐 3 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院畜牧研究所

2.南京天邦生物科技有限公司

3.南京工业大学江苏省药物安全性评价中心

关键词： 早孕因子;家兔;原核表达;蛋白纯化

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2011 年 39 卷 06 期

页码： 84-86

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过已构建的含家兔早孕蛋白因子(EPF)基因的重组表达质粒,转化大肠杆菌Rosseta(DE3),在IPTG诱导下表达硫氧还原蛋白-家兔早孕因子融合蛋白(Trx-EPF)。结果显示蛋白表达量占菌体总蛋白的30%左右。重组家兔早孕因子融合蛋白(Trx-EPF)经过Ni2+柱纯化、柱上复性,浓缩以后溶液中蛋白浓度达到10 mg/mL,复性率达到13.1%。SDS-PAGE及Western Blot分析表明,在分子量30 ku左右处有一特异性蛋白条带。

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