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麻花鸡副黏病毒ZH-1株F基因真核表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 李红丽 1 ; 詹丽娥 1 ; 乔忠 1 ; 王彩先 1 ; 陆冰洋 1 ;

作者机构： 1.山西省农科院畜牧兽医研究所

关键词： 麻花鸡副黏病毒;F基因;序列分析;重组质粒

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2009 年 24 卷 03 期

页码： 58-62

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将麻花鸡副黏病毒ZH-1株毒种接种于11日龄SPF鸡胚,收集48~96 h死亡的鸡胚尿囊液。参考已发表的鸡源副黏病毒F基因序列,设计并合成了一对特异性引物,用以扩增麻花鸡副黏病毒ZH-1株F基因,预期扩增的F基因片段包含完整的开放阅读框。通过RT-PCR扩增出麻花鸡副黏病毒ZH-1株F基因片段,琼脂糖凝胶电泳回收、纯化,得到F基因片段,经EcoRⅠ和SalⅠ消化,将F基因克隆进入PCI-neo载体,转化大肠杆菌DH5α,挑选菌落,经限制性核酸内切酶SalⅠ和EcoRⅠ双酶切及PCR鉴定,结果证明重组真核表达载体PCI-neo-F构建成功,为下一步在哺乳动物细胞Vero细胞中表达打下良好的基础。扩增的F基因测序后,与其他禽副黏病毒1型F基因进行系统发育树的分析比较,为阐明麻花鸡副黏病毒ZH-1株的遗传背景奠定了基础。

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