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葡萄基因组DNA的提取及RAPD反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 王晶晶 1 ; 吴森林 2 ; 张付春 3 ; 高疆生 4 ;

作者机构： 1.塔里木大学植物科学学院

2.新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室

3.莎车县农业技术推广中心

4.新疆农业科学院园艺作物研究所

关键词： 葡萄;DNA提取方法;RAPD;优化

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2010 年 47 卷 06 期

页码： 1066-1070

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】建立适合该地区部分葡萄品种RAPD扩增反应体系。【方法】采用阿克苏地区部分葡萄品种(系)为试材,采用改良的CTAB法提取葡萄基因组DNA,对影响葡萄RAPD反应的Mg2+、Taq酶、dNTPs、引物、模板DNA浓度进行优化。【结果】其最佳反应体系为:模板DNA 100 ng,dNTPs 0.1 mmol/L,Mg2+2.0 mmol/L,引物0.3μmol/L,Taq酶1.5 U,反应体系总体积为20μL。【结论】改良的CTAB法具有步骤少、费用低、效率高等特点,比较适用于葡萄基因组DNA的提取。优化后的体系,扩增产物稳定,条带清晰,重复性好。

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