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利用hAPOA1原核蛋白生产兔多克隆抗体

文献类型： 中文期刊

作者： 徐志伟 1 ; 赵杰 1 ; 刘伟忠 1 ; 刘照亭 1 ; 王期 1 ;

作者机构： 1.江苏丘陵地区镇江农业科学研究所;南京师范大学生命科学学院

关键词： hAPOA1;原核表达;新西兰大白兔;融合表达;多克隆抗体

期刊名称： 江苏农业科学

ISSN： 1002-1302

年卷期： 2016 年 44 卷 12 期

页码： 85-87

收录情况： 北大核心

摘要： 将hAPOA1的阅读框连接到原核表达载体pGEX-4T-1中,构建成正确的pGEX-4T-1-hAPOA1原核表达质粒,然后将其转入宿主菌BL21,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,宿主菌表达出与预期分子量大小相符的55.4ku的融合蛋白;将纯化后的包涵体融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备抗hAPOA1血清并检测抗体效价。结果表明,经间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)及蛋白质免疫印迹(WesternBlot)方法证实,获得的融合蛋白免疫新西兰大白兔得到了特异性的多克隆抗体,抗体效价为1∶40000,经济效益可观。

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