文献类型: 中文期刊
作者: 陈思 1 ; 曾磊 2 ; 陈尚武 2 ; 孙杨吾 1 ; 张文 1 ; 徐海英 3 ; 马会勤 1 ;
作者机构: 1.中国农业大学农学与生物技术学院
2.中国农业大学食品科学与营养工程学院
3.北京市农林科学院林业果树研究所
关键词: Vitis viniferaL.;愈伤组织;蔗糖转运蛋白;半定量RT-PCR
期刊名称: 生物工程学报
ISSN: 1000-3061
年卷期: 2010 年 26 卷 04 期
页码: 117-124
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 本研究通过对霞多丽葡萄花前约10d的花丝进行组培诱导,获得胚性和非胚性两种愈伤组织,分别进行继代、组织结构观察和体细胞胚的诱导验证。为研究两种愈伤组织对培养基中主要碳源蔗糖的利用特点,根据GenBank中的定位于细胞质膜的葡萄蔗糖转运蛋白基因VvSUC12和VvSUC27的序列,设计了这两种蔗糖转运蛋白的PCR引物。以RNAplant试剂法,提取胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织的RNA,进行半定量RT-PCR。研究表明,31个循环半定量RT-PCR结果中VvSUC12在胚性愈伤和非胚性愈伤中均有表达,且在非胚性愈伤组织中的表达水平稍高于胚性愈伤组织,表达差异未达到显著水平,VvSUC27的表达水平明显低于VvSUC12,且只在胚性愈伤组织中表达。提高至35个循环的半定量RT-PCR结果显示VvSUC27基因在非胚性愈伤组织中微弱表达,而在胚性愈伤组织中的表达强度较31个循环有所增加,且高于非胚性愈伤。
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