文献类型： 中文期刊
作者： 苑琳 1 ; 刘姗姗 2 ; 路福平 1 ; 李子钦 3 ; 张辉 3 ;
作者机构： 1.天津科技大学生物工程学院
2.内蒙古大学生命科学学院
3.内蒙古农牧业科学院
关键词： 尖孢镰刀菌;ISSR;正交设计;反应体系;优化;引物筛选
期刊名称： 生物技术通报
ISSN： 1002-5464
年卷期： 2011 年 0 卷 07 期
页码： 205-209
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 采用正交试验设计原理,对尖孢镰刀菌ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素进行优化筛选,确立了适合尖孢镰刀菌ISSR分析的反应体系,即25μL PCR反应体积中含有20 ng模板DNA、1 UTaq酶、0.4μmol/L引物、0.2 mmol/LdNTPs、4.0 mmol/L Mg2+和2.5μL10×buffer。PCR反应最佳退火温度根据引物而定,在此基础上筛选出12条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。此研究为今后利用ISSR技术分析尖孢镰刀菌遗传多样性和群体结构奠定了基础。
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