文献类型： 中文期刊

作者： 路杨 ¹ ; 郭文博 ¹ ; 隋丽 ¹ ; 张庆贺 ² ; 赵宇 ¹ ; 张正坤 ¹ ; 李启云 ¹ ;

作者机构： 1.吉林省农业科学院植物保护研究所/吉林省农业微生物重点实验室/农业农村部东北作物有害生物综合治理重点实验室

2.吉林省农业环境保护与农村能源管理总站

关键词： 球孢白僵菌;真菌病毒BbCV2;多克隆抗体;免疫荧光;亚细胞定位

期刊名称： 中国生物防治学报

ISSN： 2095-039X

年卷期： 2024 年 003 期

页码： 583-591

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 球孢白僵菌Beauveriabassiana是一种在害虫生物防治中应用广泛的虫生真菌，真菌病毒能够影响球孢白僵菌的致病力和生物学性状，但真菌病毒相关蛋白的抗体制备和利用其进行病毒检测和定位鲜有报道。本研究原核表达了一株普遍流行并且造成寄主球孢白僵菌毒力下降的双链RNA（double stranded RNA,dsRNA）病毒Beauveria bassiana chrysovirus 2（Bb CV2）的外壳蛋白（Coat protein,CP），并制备了多克隆抗体，进行了病毒在寄主球孢白僵菌胞内和胞外的检测，以及利用间接免疫荧光进行病毒在寄主内的定位。结果表明，表达的BbCV2-CP蛋白主要以包涵体的形式存在，相对分子质量约为85.7kD；经间接ELISA方法测定，制备的BbCV2-CP兔源多抗效价达到1:8192000;Westernblot结果显示，制备的BbCV2兔源多抗能与抗原蛋白进行特异性结合，且能检测出感染寄主球孢白僵菌的BbCV2;ELISA测定结果表明病毒BbCV2可在寄主真菌体内复制，并能够游离到寄主体外；经间接免疫荧光观察，发现BbCV2病毒定位于真菌细胞核中。本研究建立了球孢白僵菌真菌病毒的血清学检测体系，为球孢白僵菌-真菌病毒互作机制研究提供材料。