文献类型： 中文期刊
作者： 王丽 1 ; 李学伍 2 ; 腾蔓 ; 杨艳艳 3 ; 李娅丽 4 ;
作者机构： 1.吉林大学
2.河南省农业科学院畜牧兽医研究所
3.河南省农业科学院生物技术研究所
4.河南农业大学牧医工程学院
关键词： 猪瘟病毒;CSFV Erns/E2;嵌合基因;融合蛋白;单克隆杂交瘤细胞系
期刊名称： 细胞与分子免疫学杂志
ISSN： 1007-8738
年卷期： 2009 年 25 卷 12 期
页码： 1126-1129
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 目的:制备抗猪瘟病毒(CSFV)C株Erns/E2嵌合基因表达蛋白的单克隆抗体(mAb),探讨Erns/E2蛋白的分子结构和生物学功能。方法:在大肠杆菌RosettaTM2(DE3)中表达了猪瘟病毒(CSFV)C株Erns、E2蛋白主要抗原域的嵌合基因CSFVErns/E2蛋白;以纯化复性后的CSFVErns/E2为免疫原,按常规方法免疫BALB/c小鼠,应用淋巴细胞杂交瘤技术制备抗CSFVErns/E2 mAb;利用间接ELISA、Western blot、Dotblot方法鉴定mAb生物学特性。结果:获得了1株稳定分泌抗CSFVErns/E2融合蛋白的单克隆杂交瘤细胞系C8株,该株mAb的细胞培养上清效价为1∶6400,小鼠腹水效价1∶2×105。其免疫球蛋白亚类为IgG1。间接ELISA和Western blot结果显示该株mAb不与猪瘟C株细胞毒、pET-32a标签蛋白反应,仅与融合表达的CSFVErns/E2蛋白存在特异性反应。Dot blot结果表明其识别的抗原表位为E2蛋白的RSGL-CPFDTSPV氨基酸序列。结论:获得了一株能特异识别E2蛋白抗原表位的mAb,为进一步研究CSFV的分子结构及功能奠定了物质基础。
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