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利用E.coli-App穿梭载体构建温控双基因裂解载体pMC-WK

文献类型： 中文期刊

作者： 孙颖 1 ; 金天明 1 ; 冯立文 1 ; 袁洁 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院兽医研究所

关键词： 裂解蛋白E;核酸酶A;App菌影;穿梭载体

期刊名称： 中国兽医学报

ISSN： 1005-4545

年卷期： 2011 年 31 卷 09 期

页码： 1304-1308

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用PCR方法从噬菌体PhiX174基因组中扩增出裂解蛋白E基因,从金黄色葡萄球菌基因组中扩增出核酸酶A基因(SN),通过15个柔性氨基酸linker将双基因串联,插入PBV220表达载体,构建温控双基因裂解系统(DLS)。PCR扩增DLS,将其与E.coli-App穿梭载体pMC-Express相连,构建重组穿梭载体pMC-WK。裂解试验表明,E-15aalinker-SN裂解较E裂解迅速而彻底,菌体裂解率达到99.999 4%;经PCR扩增出的DLS具有裂解活性。本试验成功构建了温控双基因裂解载体pMC-WK,为App菌影疫苗的研究奠定了基础。

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