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口蹄疫病毒3D蛋白C端Th表位的重组表达及免疫功能鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 王世红 1 ; 张改平 2 ; 卢清侠 2 ; 金前跃 2 ; 刘畅 2 ; 常咏哲 2 ; 王爱萍 1 ;

作者机构： 1.郑州大学生物工程系

2.河南省农业科学院

关键词： 口蹄疫病毒;3D蛋白;Th表位;原核表达;蛋白纯化

期刊名称： 西北农业学报

ISSN： 1004-1389

年卷期： 2013 年 22 卷 04 期

页码： 11-16

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为获得含有口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)3D蛋白C端多个Th表位的重组表达蛋白,根据口蹄疫3DC端160个氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pET28a,构建原核表达质粒pET28a-C160,并将重组质粒转化BL21(DE3),0.5mmol/L IPTG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果显示,在25ku处有一条明显的蛋白表达条带,且重组蛋白能与豚鼠抗O型口蹄疫病毒阳性血清发生特异性反应。对表达产物进行可溶性分析,结果显示,表达蛋白全部以包涵体形式存在,经变复性后获得较高质量浓度的纯化蛋白。可见:用纯化的3DC160蛋白作为Th佐剂与口蹄疫主抗原混合制成疫苗,免疫后能刺激猪体产生较高水平的口蹄疫抗体。

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