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雪莲PBP基因表达载体的构建

文献类型： 中文期刊

作者： 李萍 1 ; 艾秀莲 1 ; 王志方 1 ; 王博 1 ;

作者机构： 1.新疆农科院微生物应用研究所

关键词： 雪莲;磷脂酰乙醇胺结合蛋白;根癌农杆菌

期刊名称： 生物技术

ISSN： 1004-311X

年卷期： 2006 年 16 卷 02 期

页码： 11-13

收录情况： CSCD

摘要： 目的:利用新疆雪莲特殊功能基因磷脂酰乙醇胺结合蛋白基因(XLPBP)与基础质粒构建植物表达载体pXLPBP,为介导该基因在植物中表达,以期提高植物抗寒力的转基因研究打下基础。方法:利用设计好的两端加有EcoRⅠ酶切位点的引物,对XLPBP全长基因片段进行PCR扩增,获得700bp左右大小的片段,将其纯化回收并与同样经过EcoRⅠ酶切的质粒pCAMBIA3301连接;然后采用冻融法和电击法,将含XLPBP基因的载体pCAMBIA3301转入根癌农杆菌中。结果:通过一系列分子克隆方法获得含雪莲XLPBP基因的植物表达载体,并经PCR实验证实。结论:利用以自身携带的非编码区为调控序列的XLPBP全长基因和双向表达载体pCAMBIA3301为基础构建植物表达载体,可望提高外源基因表达量。

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