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莴苣属蔬菜资源SRAP标记PCR体系的构建与优化

文献类型： 中文期刊

作者： 刘丽娟 1 ; 刘灶长 1 ; 陈海荣 1 ; 罗利军 1 ;

作者机构： 1.上海市农业生物基因中心

关键词： 莴苣;SRAP;PCR扩增体系

期刊名称： 植物遗传资源学报

ISSN： 1672-1810

年卷期： 2008 年 9 卷 02 期

页码： 157-162

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以莴苣为材料研究了影响SRAP标记PCR结果的因素,包括Mg2+、dNTP、引物、Taq酶的浓度以及退火温度等,建立了适用于莴苣属蔬菜SRAP分析的PCR反应体系:在20μl反应体系中,模板DNA为50ng,Mg2+浓度为2.0mmol/L,dNTP浓度为0.2mmol/L,引物浓度为0.75μmol/L,Taq酶用量为1U。适宜的扩增程序为94℃5min;94℃1min,35℃1min,72℃1min,5个循环;94℃1min,51℃1min,72℃1min,30个循环;72℃7min。对体系的验证结果表明本研究建立的莴苣SRAP体系重复性好、分辨率高、多态性丰富,在莴苣属蔬菜种质资源评价、分子标记辅助选择育种等多方面都有重要作用。

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