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黄瓜花叶病毒CP基因原核表达及抗血清的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 秦云霞 1 ; 曾华金 1 ; 刘志昕 1 ; 田娥 1 ;

作者机构： 1.中国热带农业科学院热带作物生物技术国家重点实验室

关键词： 黄瓜花叶病毒;外壳蛋白;原核表达;酶联免疫吸附试验

期刊名称： 中国生物工程杂志

ISSN： 1003-3505

年卷期： 2004 年 24 卷 08 期

页码： 73-76

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 把黄瓜花叶病毒 (CMV)西番莲分离物的外壳蛋白 (CP)基因 ,通过BamHI SacI位点定向插入pET 2 2b( + )载体 ,转化大肠杆菌BL2 1 (DE3)中 ,经IPTG诱导下 37℃培养 6h ,SDS PAGE电泳示表达蛋白分子质量为 31 8kDa ,表达量占菌体总蛋白的 2 8 9%,表明该蛋白得到了高效表达。用冰冷的氯化钾溶液显色 ,用表达的特异蛋白质条带制备抗原 ,免疫家兔制备出病毒特异抗血清。采用ID ELISA测定抗血清效价为 1 0 -6;抗血清和CMV几个分离物均有特异反应 ,和TMV、菌体蛋白不发生非特异性反应 ;检测病毒灵敏度达 30ng ml,能够从稀释 31 2 5倍的感病植物汁液中检测出病毒

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