文献类型： 中文期刊

作者： 林梦娇 ¹ ; 陈亚东 ¹ ; 刘洋 ² ; 王磊 ² ; 张天时 ² ; 史萌 ² ; 陈松林 ² ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院黄海水产研究所海水养殖生物育种与可持续产出全国重点实验室

关键词： 半滑舌鳎;免疫;vstm2a;跨膜蛋白;细菌结合

期刊名称： 上海海洋大学学报

ISSN： 1674-5566

年卷期： 2024 年 33 卷 006 期

页码： 1299-1312

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了探究半滑舌鳎vstm2a基因响应细菌感染的表达特征和其蛋白功能，采用实时荧光定量（RTqPCR）检测哈维氏弧菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌和无乳链球菌感染半滑舌鳎后免疫组织（鳃、肝脏、脾脏、肠道和肾脏）中vstm2a的相对表达特征；构建vstm2a基因原核表达重组质粒，获得重组蛋白，采用牛津杯法、细菌蛋白结合实验和siRNA沉默等，探究vstm2a蛋白在细菌入侵中的功能。结果显示：vstm2a蛋白具有跨膜结构域和Ig结构域，在细胞表面行使功能；相关免疫组织中的vstm2a基因的表达量在哈维氏弧菌、鳗弧菌、溶藻弧菌、迟缓爱德华氏菌和无乳链球菌感染半滑舌鳎后6 h、48 h和72 h显著升高；vstm2a重组蛋白与细菌孵育后，经过低速离心与细菌共同沉淀；抑菌实验显示其显著抑制细菌的生长，并且siRNA降低vstm2a基因后，抑制了细胞因子IL-6和IL-10等基因的表达。证明了vstm2a蛋白响应细菌入侵，可以识别和结合细菌，通过抑制细菌生长和激活促炎症细胞因子，对病原菌的感染起到免疫防御作用，是一种重要的免疫蛋白。本研究有助于解析细菌黏附细胞或鱼体抵抗细菌入侵的机制，为未来采用分子手段选育抗性品种提供一定的理论基础。